2023·卷行天下·周测卷·生物[23新教材·ZC·生物学-R-选择性必修1-HEB](六)6答案

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21.（13分，除标注外，每空1分)》(1)限制酶、DNA连接酶和载体(3分)具有特定的限制酶切割位点、具有标记基因(2分)(2)启动子将含有基因表达载体的毕赤酵母筛选出来(2分)(3)钙离子感受态(4)分子杂交碱性果胶酶对应菌株产酶能力越强（或“对应菌株产酶数量越多”）【解析】(1)将碱性果胶酶基因pel(目的基因)转入毕赤酵母（受体细胞）中表达，该过程需要构建基因表达载体，此时需要限制酶、DNA连接酶和载体作为工具。作为基因表达载体必须具备的条件是：一是在宿主细胞中进行自我复制，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行同步复制，即能在宿主细胞中稳定保存并大量复制，以便提供大量的目的基因；二是具有特定的（或一个至多个）限制酶切点，以供外源DNA片段（目的基因）插人其中；三是具有某些标记基因，以便供重组DNA的鉴定和选择。(2)启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，标记基因的作用是将含有基因表达载体的毕赤酵母（受体细胞)筛选出来。(3)毕赤酵母属于单细胞的微生物；将基因表达载体导入毕赤酵母时，应采用钙离子(Ca2+)处理毕赤酵母，使其处于感受态。(4)目的基因在受体细胞是否能转录出mRNA,可用分子杂交技术来检测。抗原一抗体杂交技术可以检测是否表达出碱性果胶酶，导入目的基因的毕赤酵母产生的碱性果胶酶能水解平板上的果胶，形成水解圈；水解圈越大，代表对应菌株产酶能力越强或对应菌株产酶数量越多。

20.B【解析】动物基因工程中，选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为该细胞全能性高，并且受精卵和其他细胞相比体积大，容易操作，A正确；采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否稳定存在及是否正常转录，但不能检测其是否翻译，B错误；小鼠膀胱上皮细胞合成并分泌生长激素，可以从其尿液中提取人的生长激素，不受性别和时间限制，从而降低生产成本，C正确；基因表达在时间和空间上调控，是基因工程中的面临的难题之一，如何让基因在膀胱上皮细胞中表达并分泌出来在构建膀胱生物反应器中就是一大难题，D正确。